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足球直播生物仪器分析复习题及答案

发布时间:2021-02-16 04:04  

  1.谈谈科学仪器在生命科学中的重要性。科学仪器促进科学技术的发展 科学仪器是经济发展的推动力倍增器 科学仪器是可持续发展的保证和指路标 科学仪器是打破贸易壁垒的强有力工具 科学仪器是确保国家安全的利剑 科学仪器是打击犯罪的有力手段 科学仪器是开展生命科学研究的支撑 2.什么是标准曲线?如何制作标准曲线? 标准曲线是被测物质的浓度或含量与仪器响应信号的关系曲线。 标准曲线是依据标准系列(或含量)和其相应的响应信号测量值来绘制的。 一元线.什么是相关系数?如何计算?相关系数大小具有什么意义? 在分析化学上,相关系数是用来表征被测物质的浓度(或含量)x 与其响应信号值y 之间线 性关系好坏程度的一个统计参数。 之间的线.什么是灵敏度?灵敏度的意义? 物质单位浓度或单位质量的变化引起响应信号值变化的程度,称为方法的灵敏度,用 灵敏度也就是标准曲线的斜率,斜率越大,方法的灵敏度就越高。5.什么是精密度?精密度的意义? 精密度是指使用同一方法,对同一试样进行多次测定所得测定结果的一致程度。 精密度常用测定结果得标准偏差 或相对标准偏差(sr)量度。6.什么是准确度?什么是仪器的检出限?如何计算? 试样含量的测定值与试样含量的真实值(或标准值)相符合的程度称为准确度。准确度常用相 对误差量度。 某一方法在给定的置信水平上可以检出被测物质的最小质量,称为这种方法对该物质的检出 限,以浓度表示的称为相对检出限,以质量表示的称为绝对检出限。 dxdc dm 1.什么是超净工作台?其工作原理是什么?超净工作台能否用于生物安全二级以上的病原微生物操作? 在操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等实验材料时,为避免实验材料受到环境中未经 过滤的空气中污染而设计的一种为实验室工作提供无菌操作环境的洁净设备。 超净台由三相电机作鼓风动力,功率145-260W左右,将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片 层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来,形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流,即所 谓“高效的特殊空气”,它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流 24-30m/min,这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。 不能 2.什么是生物安全柜?其工作原理是什么?生物安全柜能否用于生物安全二级以上的病原 微生物操作? 是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者 本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶 和溅出物而设计的一种安全防护设备。 实验对象保护(product protection):生物安全柜设计中的第二个改进是将经 HEPA 过滤的 空气输送到工作台面上,从而保护工作台面上的物品不受污染。操作者和环境保护:在排风 系统增加了 HEPA 过滤器。对于直径 0.3μm 的颗粒,HEPA 过滤器可以截留 99.97%,而 对于更大或更小的颗粒则可以截留 99.99%。HEPA 过滤器的这种特性使得它能够有效地截 留所有已知传染因子,并确保从安全柜中排出的是完全不含微生物的空气,从而达到对操作 者和环境的保护。 级生物安全柜可以3.超净工作台安装、使用和维护应该注意什么? 超净台使用寿命的长短与空气的洁净程度有关。 在温带地区超净台可在一般实验室使用,然而在热带或亚热带地区,由于大气中含有高量的 花粉,或多粉尘的地区,超净台则宜放在较好的有双道门的室内使用。 任何情况下都不应将超净台的进风罩对着开敞的门或窗,以免影响滤清器的使用寿命。 调整各脚的高度,以保证稳妥和操作面的水平。 超净工作台的供电应采用一条专门电路,以避免电路过载造成空气流速的改变。 检查紫外线杀菌灯、照明用日光灯和鼓风机提供空气流动的动力。 空气滤板及其密封性:采用营养琼脂平板法。 每次使用超净工作台时,实验人员应先开启超净工作台上的紫外灯,紫外照射20 分钟后使 开启超净工作台工作电源,关闭紫外灯,并用75%的酒精或0.5%过氧乙酸喷洒擦拭消毒工作台面。 接种室内力求简洁,凡与本室工作无直接关系的物品一律不能放入,以利保持无菌状态。 整个实验过程中,实验人员应按照无菌操作规程操作。 实验结束后,用消毒液擦拭工作台面,关闭工作电源,重新开启紫外灯照射15 分钟。 首先要保持室内的干燥和清洁,潮湿的空气既会使制造材料锈蚀,还会影响电气电路的正常 工作,潮湿空气还利于细菌、霉菌的生长。清洁的环境还可延长滤板的使用寿命。 另外,定期对设备的清洁是正常使用的重要环节。清洁应包括使用前后的例行清洁和定期的 熏蒸处理。熏蒸时,应将所有缝隙完全密封。清洁应包括使用前后的例行清洁和定期的熏蒸 处理。熏蒸时,应将所有缝隙完全密封,如操作口设有可移动挡板封盖的类型超净工作台, 可用塑料薄膜密封。 超净工作台的滤板和紫外杀菌灯都有标定的使用年限,应按期更换。 无菌室应定期用70%酒精或0.5%苯酚喷雾降尘和消毒,用2%新洁尔灭抹拭台面和用具(70% 酒精也可),用福尔马林(40%甲醛)加少量高锰酸钾定期密闭熏蒸,配合紫外线 分钟以上)等等消毒灭菌手段,以使无菌室经常保持高度的无菌状态。 4.什么是超净工作台?按照其气流方向超净工作台可以分为几种类型? 在操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等实验材料时,为避免实验材料受到环境中未经 过滤的空气中污染而设计的一种为实验室工作提供无菌操作环境的洁净设备。 水平单向流超净工作台:HS 新颖型(高级),HT 分离套入型入型,SW-CJ 系列标准型 垂直单向流超净工作台:VT 分离套 5.什么是生物安全柜?按其安全级别生物安全柜可分为几种类型? 是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者 本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶 和溅出物而设计的一种安全防护设备。 6.二级生物安全柜可分为几种类型?各具有什么特点? 级生物安全柜有四种不同的类型:级A1 型生物安全柜,外排风式级A2 型生物安全 型生物安全柜,级B2型生物安全柜 7.超净工作台和生物安全柜都可以用于微生物的操作,二者有何区别? 超净工作台是为了保护实验材料而设计的,通过风机将空气吸入预过滤器,经由静压箱进入 高效过滤器过滤,将过滤后的空气以垂直或水平气流的状态送出,使操作区域达到百级洁净 度,保证生产对环境洁净度的要求,只能保护样品,不保护操作人员。生物安全柜是一种负 压的净化工作台,正确操作生物安全柜,能够完全保护工作人员、受试样品并防止交叉污染 的发生;而超净工作台只是保护操作对象而不保护工作人员和实验室环境的洁净工作台。因 此,在微生物学和生物医学的科研、教学、临床检验和生产中,应该选择和使用生物安全柜, 而不能够选择和使用超净工作台。从洁净级别看,生物安全柜也比超净工作台高级。 1.什么是细胞电穿孔?细胞电穿孔的原理是什么? 细胞电穿孔是利用脉冲电场的瞬时电脉冲使处于高压电场中的细胞膜穿孔产生可逆性孔径, 从而使外源RNA、DNA 蛋白分子和各种小分子进入细胞,产生具有新的生物性状的转化细胞 株的一种生物物理技术。 细胞膜是一个绝缘体,在电场中类似一个电容。 将细胞悬浮在含离子的电解质溶液中,当外加电场时,引起膜两边电解质离子极化,足球直播!形成外 加的膜电位差,这个电位差的形成时间常数由摸得等效电容充电时间决定。 设细胞为球形,悬浮在溶液里并处于电场中。电场诱导的膜电位可由下式表示:V=1.5αE cos 当外加电场超过细胞膜电容的集线电压时,细胞膜电容被击穿,从而在细胞膜的磷脂双分子层上形成穿孔。 如果高压电脉冲的宽度在几百微秒之内,细胞膜的磷脂双分子层可复原。 2.什么是细胞电融合?细胞电融合的原理是什么? 细胞电融合是通过非均匀电场的电泳作用使细胞间的接触变得非常紧密,进而发生融合的技 A.聚集:在交流电场中,细胞定向排列成行,互相紧密接触。B.融合脉冲:采用仅仅15 微秒的方波脉冲穿透细胞膜,细胞膜发生可逆穿孔。 C.异核体期:相邻的穿孔细胞膜之间发生融合,细胞质也随之混合。只有细胞核仍然保持 分离状态。 D.完全融合:异核体中细胞核之间也发生融合。根据常识,染色体数量下降。 3.影响电穿孔和电融合的原理有哪些? 1)电脉冲的幅度、时间和脉冲波形 临界电压:是指使细胞膜不稳定而被击破的最低电压。 电脉冲时间:脉冲的宽度必须比膜的充电时间和膜的弹性复原时间长,这样才能保证孔道在 脉冲以后有机会继续开放一段时间。 波形:交流脉冲或多次脉冲能够充分利用脉冲电场的相向电泳压力,往往比单个直流(方形) 脉冲有效。穿孔用的电脉冲在以峰电压击破细胞膜后以较低的电压维持空岛的短时间开放, 有利于提高电穿孔效率。因此指数衰减的电脉冲往往比同能量的方形波有效。 2)胶体渗透压和细胞膨胀 避免细胞破裂:在细胞外的缓冲液中加入大分子维持细胞内外的渗透压平衡。 稍低渗透压的缓冲液:穿孔前把细胞放在稍低渗透压的缓冲液中,让细胞略微膨胀,细胞膜 张力增高,有利于脉冲击穿细胞膜,以及有张力的膜容易扩大,利于电融合过程。 3)细胞膜复原 温度:细胞复原期间温度越低,复原时间越长。 外液渗透压:细胞复原期间细胞膜上穿孔仍在,细胞内外渗透压需要仔细调节,而且细胞脆 弱,要便面机械振荡,尽量避免使用移液管或离心操作。 外液中离子:一方面影响细胞的生存,一方面影响细胞膜复原的速度。 脉冲强度和宽度:脉冲强度和宽度越大,孔也越大,药物进入快,融合效率高,但细胞对胶 体渗透压和离子平衡也更敏感。 4)离子 低钠缓冲液在电穿孔过程中,对稳定细胞膜内外的钠钾浓度梯度更加有利,有利于细胞膜静 息电位的维持,因此对细胞存活率更为有利。 4.细胞电穿孔和电融合仪有哪些用途? 细胞电穿孔和电融合仪可以为细菌,酵母菌穿孔以及进行细胞融合 应用举例 •胚胎操作/核移植/动物克隆 核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育,导致新生体安全出生。 在这个过程中,电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合,并进一步激活细胞分裂,形成胚 胎。Meng 等人(1997)将核移植技术扩展至灵长类动物模型,克隆出恒河猴。技术的进步 使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞,作为核的供应来 源。胚胎产生的细胞在体外培养 6-13 代,然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。 如前文所述,Roble、Cibelli 以及Stice 是第一次在1998 年报告使用非老化胚成纤维细胞作 为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut 在1996 年震惊了整个世 界,他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆——多利。使用分化的成年细胞进行克隆的 能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例 PPL Therapeutics 公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微 型载玻片。 •动物细胞融合 肿瘤及树突的电融合目前在过继性免疫疗法中进行使用。肿瘤细胞本身不能作为良好的抗原 提成细胞,足球直播因此不会刺激 细胞生长。树突细胞是已经发现的最好的抗原提呈细胞,在融合后可以将肿瘤细胞转变成抗原提呈细胞。刺激后比未融合肿瘤细胞至少增加100 倍。对于 这些用途可以使用多种细胞融合附件及微型载玻片。 •杂交瘤/细胞杂交瘤技术 在过去十年中,使用电融合技术进行杂交瘤的产生及抗体大大增加。电融合的过程可以通过 显微镜进行观察,与 PEG 相比需要的细胞数量较少。使用电融合用于这种用途还有无毒性 及高效性的优点。Panova 等人(1995)通过把人类B 细胞与Heteromyeloma、Spam-8 细胞 进行电融合增强了人类杂交瘤的生成。Kreutz 等人(1998)引入了一种使用电融合及FACS 分选的新方法产生细胞杂交瘤。Cao 等人(1995)建立了另一种快速非选择性方法通过电融 合产生人类细胞杂交瘤。数据明确支持电融合用于这种重要目的的有效性。对于这些用途可 以使用多种细胞融合附件及微型载玻片。 1.什么是实验室感染?发生实验室感染的原因有哪些? 实验室相关感染:由于从事实验活动而发生的与操作的生物因子相关的感染。在研究病原微 生物中存在某种风险,如果在管理和操作病原体中一旦有所疏漏或错误就会发生实验室感 染,造成威胁,进而可能造成病原体扩散或传染病的流行。 自然途径感染:呼吸道:吸入微生物气溶胶,消化道:食入,皮肤、黏膜污染 微生物直接接种:刺伤、割伤,感染的实验动物咬伤,媒介昆虫咬伤 „„还有许多不明原因的实验室相关感染 2.世界卫生组织(WHO)根据危险度将微生物划分为那几个等级? WHO 将微生物按照危害性分为四个等级,级危害性最低,级危害性最高。 3.中国国务院和卫生部根据危险度将微生物划分为那几个类别? 我国根据危害性将微生物分为四类,类危险性最高,类危险性次之,类仅具有一般危 险性,类危险性最低。 4.请比较世界卫生组织(WHO)微生物危险度等级和中国国务院微生物危险度分类。 危险度级:无或极低的个体和群体危险,即不太可能引起人或动物致病的微生物。 第类:在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物,如生物制品、菌苗、疫苗生产 用的各种减毒、弱毒菌种以及不属于上述、、类的各种低致病性微生物菌种。 危险度级:个体危险中等,群体危险低,即能够对人或动物致病,但对实验室工作人员、 社区、牲畜或环境不易导致严重危害,其实验室暴露也许会引起严重感染,但对感染有有效 的预防和治疗措施,并且疾病传播的危险有限的微生物。 第类:能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害, 传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物, 如葡萄球菌、链球菌、沙门菌,志贺菌、致病性大肠埃希菌、副溶血弧菌、钩端螺旋体、流 感病毒、麻疹病毒、柯萨奇病毒等。 危险度级:个体危险高,群体危险低,即通常能引起人或动物的严重疾病,但一般不会发 生感染个体向其他个体的传播,并且对感染有有效的预防和治疗措施的微生物。 第类:能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动 物与动物间传播的微生物,如炭疽芽孢杆菌、肉毒梭菌、结核分枝杆菌、狂犬病病毒、流行 性出血热病毒、人类免疫缺陷病毒等。 危险度级:个体和群体的危险均高,病原体通常能引起人或动物的严重疾病,并且很容易 发生个体之间的直接或间接传播,对感染一般没有有效的预防和治疗措施。 第类:能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消 灭的微生物,如鼠疫耶尔森氏菌、霍乱弧菌、天花病毒。 5.什么是生物安全实验室?它分为哪几个级别? 由一级防护屏障(安全设备)和二级防护屏障(实验室设施)组合构成四级生物安全水平。 生物安全1 级(Biosafety Level-1,BSL-1) 生物安全2 级(BSL-2) 生物安全3 级(BSL-3) 生物安全4 级(BSL-4) 6.什么是BSL-1 级生物安全实验室?它适用于哪些微生物的操作?应该具有何种一级、二级 安全屏障? BSL-1 适合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、对实验室工作人员和环境危害性 最小的生物因子(对应于我国的第四类危害的微生物)的工作。BSL-1 实验室属于基础实验室, 适用于基本的教学和科研。 BSL-1 不需要特殊的一级屏障,依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。 BSL-1 实验室不必和建筑物中的一般行走区分开,但要求具有实验室安全运行、清洁和维护 的足够空间,保证实验室内所有活动的照明,避免不必要的反光和闪光。 实验室墙壁、天 花板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀,地板应当防滑;而且为 安全操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。 实验台面 应是防水的,并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用,在出口处安装有用自来 水的洗手池。 实验室的门应有可视窗,并达到适当的防火等级,最好能自动关闭。实验室 工作区外有存放外衣和私人物品的设施,以及进食、饮水和休息的场所。 7.8.9:由于PPT 错误无法进行解析,请耐心等待。 201112 21 (下一部分复习题请稍后,广告之后精彩继续)